|
|
ข้อมูลการเผยแพร่ผลงาน
|
| ชื่อบทความที่เผยแพร่ |
Whole Blood Pcr Kit For Rapid Identification Of α0-Thalassemia |
| วัน/เดือน/ปี ที่เผยแพร่ |
11 พฤษภาคม 2561 |
| การประชุม |
| ชื่อการประชุม |
ISLH 2018 |
| หน่วยงาน/องค์กรที่จัดประชุม |
the International Society for Laboratory Hematology (ISLH) and the Belgian Society on Thrombosis and Haemostasis (BSTH) |
| สถานที่จัดประชุม |
SQUARE Meeting Centre, Brussels, Belgium |
| จังหวัด/รัฐ |
Brussels, Belgium |
| ช่วงวันที่จัดประชุม |
9 พฤษภาคม 2561 |
| ถึง |
12 พฤษภาคม 2561 |
| Proceeding Paper |
| Volume (ปีที่) |
- |
| Issue (เล่มที่) |
- |
| หน้าที่พิมพ์ |
- |
| Editors/edition/publisher |
- |
| บทคัดย่อ |
Introduction: α0-thalassemia is the most severe form of α-thalassemia found among Southeast Asian and Chinese populations. The two common forms are α0-thalassemia genes with SEA and THAI deletions. Definite diagnosis of the cases relies mainly on DNA analysis of these two deletions. This requires in most laboratories DNA preparation step prior to PCR analysis. This could be labor intensive, time consuming and costly, making it unsuitable for large scale population screening and application in such areas where molecular testing is limited. We have evaluated our in-house developed whole blood PCR kit for identification of these two common α0-thalassemia genes.
Methods: Evaluation of the whole blood PCR kit was done independently at two different centers. Briefly, three microliters of whole blood specimen was mixed with 15 µL of pre-PCR reagent developed (0.005 M NaOH, 0.1 M NaCl, 1%Triton-X and 5% dimethylsulfoxide) for 5 seconds. Three µL of this mixture was added directly to PCR reagent containing high pH PCR buffer, 0.4 mM dNTPs, 3 mM MgCl2, 1.005 M Betaine, 2% Dimethyl Sulfoxide, 3.2 units Taq DNA polymerase and α0-thalassemia specific primers. After initial heating at 95 °C for 15 min, a PCR process (95 °C for 1 min, 63 °C for 1 min and 72 °C for 90 sec) was carried out for 32 cycles. The PCR amplicon was analyzed on 2% agarose gel electrophoresis and visualized under UV light after staining with ethidium bromide. At the two centers, results were compared with those determined using standard method on purified DNA specimen. A total of 214 cases (105 and 109 cases at the two centers, respectively) were tested.
Results: Thirteen of 105 and 10 of 109 cases were identified as α0-thalassemia carriers with the SEA deletion at the two centers. The results showed 100% concordance with that of the conventional gap-PCR assay on purified DNA specimens.
Conclusions: The whole blood PCR assay is rapid, simple and reliable and should be applicable in routine screening of α0-thalassemia in a prevention and control program of thalassemia in the region. |
| ผู้เขียน |
|
| การประเมินบทความ (Peer Review) |
มีผู้ประเมินอิสระ |
| มีการเผยแพร่ในระดับ |
นานาชาติ |
| รูปแบบ Proceeding |
Abstract |
| รูปแบบการนำเสนอ |
Poster |
| เป็นส่วนหนึ่งของวิทยานิพนธ์ |
เป็น |
| ผลงานที่นำเสนอได้รับรางวัล |
ไม่ได้รับรางวัล |
| แนบไฟล์ |
|
| Citation |
0
|
|
|
|
|
|
|
|
|
การเผยแพร่ในรูปของบทความวารสารทางวิชาการ
English