|
Publication
|
Title of Article |
การโคลนยีนที่ผลิตเอนไซม์1,3-Propanediol dehydrogenase จาก
Lactobacillus buchneri |
Date of Acceptance |
7 December 2020 |
Journal |
Title of Journal |
วารสารวิทยาศาสตร์ มข. |
Standard |
TCI |
Institute of Journal |
คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น |
ISBN/ISSN |
|
Volume |
49 |
Issue |
1 |
Month |
มกราคม-มีนาคม |
Year of Publication |
2021 |
Page |
|
Abstract |
ปัจจุบันอุตสาหกรรมด้านเชื้อเพลิงชีวภาพมีการขยายตัวอย่างรวดเร็ว ส่งผลให้กลีเซอรอล ซึ่งเป็นผลผลิตพลอยได้
จากการผลิตเชื้อเพลิงชีวภาพมีปริมาณเพิ่มขึ้นอย่างมาก กลีเซอรอลสามารถเปลี่ยนเป็นสาร 1,3-Propanediol (1,3-PD) ซึ่ง
เป็นสารเคมีพื้นฐานที่ใช้ในกระบวนการอุตสาหกรรมหลายชนิด งานวิจัยนี้ได้ท าการโคลนยีน dhaT ซึ่งถอดรหัสเป็นเอนไซม์
1,3-Propanediol dehydrogenase (1,3-PDH) ซึ่งเป็นหนึ่งในเอนไซม์ในวิถีการเมแทบอลิซึมกลีเซอรอลไปเป็นสาร 1,3-PD
โดยท าการเพิ่มปริมาณยีน dhaT จาก Lactobacillus buchneriด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (polymerase chain
reaction; PCR) จากนั้นเชื่อมต่อชื้นยีนเข้ากับเวคเตอร์พาหะ pET-28a(+) และน าเข้าสู่Escherichiacoli สายพันธุ์BL21 ท า
การตรวจสอบโคลนด้วยเทคนิค colony PCR และสกัดพลาสมิดลูกผสมเพื่อส่งวิเคราะห์ล าดับเบส ผลการทดลองพบว่า
สามารถโคลนยีน dhaT ซึ่งมีขนาด 1,200 คู่เบส จาก L. buchneri ได้ส าเร็จ จากการวัดกิจกรรมเอนไซม์1,3-PDH ของ E.
coli ลูกผสมพบว่ามีค่ากิจกรรมของเอนไซม์เท่ากับ 41.27 mU/mg ในขณะที่ค่ากิจกรรมของเอนไซม์ดังกล่าวใน L. buchneri
มีค่าเท่ากับ 52.17 mU/mg เซลล์E. coli ลูกผสมสามารถเจริญได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีมีกลีเซอ- รอลเป็นแหล่งคาร์บอน
เพียงอย่างเดียว จากผลการทดลองเหล่านี้แสดงให้เห็นว่างานวิจัยนี้สามารถแสดงออกโปรตีนจากยีน dhaT ที่โคลนเข้าไปได้
ส าเร็จ ซึ่งจะได้น าความรู้จากงานวิจัยนี้ไปศึกษาต่อยอดเพื่อพัฒนาการผลิตสาร 1,3-PD จากกลีเซอรอลต่อไป
|
Keyword |
1,3-Propanediol dehydrogenase, dhaT, Lactobacillus buchneri |
Author |
|
Reviewing Status |
มีผู้ประเมินอิสระ |
Status |
ได้รับการตอบรับให้ตีพิมพ์ |
Level of Publication |
ชาติ |
citation |
true |
Part of thesis |
true |
ใช้สำหรับสำเร็จการศึกษา |
ไม่เป็น |
Attach file |
|
Citation |
0
|
|
|
|
|
|
|